色谱分离柱遇到基线漂移怎么办
点击次数：1554 更新时间：2022-11-10
色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
如果你遇到基线漂移，知道是什么问题吗？漂移问题主要包括基线漂移和保留时间漂移。
1基线漂移
一般说来，机器刚起动时，基线容易漂移，大概要半个小时的平衡时间，如果，你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下(220nm)平衡时间相对会比较长，但是，如果你在实验过程中发现基线漂移，则你要考虑下面的原因：
①紫外灯能量不足。
解决方法：
更换新的紫外灯；
②柱温波动。
解决方法：
控制好柱子和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
③流通池被污染或有气体。
解决方法：
用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池(最好断开柱子)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用盐酸)。
④流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。
解决方法：
检查流动相的组成，使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
⑤样品中有强保留的物质(高K'值)以馒头峰样被洗脱出，从而，表现出一个逐步升高的基线。
解决方法：
使用保护柱，如有必要，在进样之间。在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。
⑥检测器没有设定在最大吸收波长处。
解决方法：
将波长调整至最大吸收波长处；
⑦流动相的pH值没有调节好。
解决方法：
加适量的酸或碱调至最佳pH值；
2保留时间漂移
保留时间重现是液相性能好坏的一个重要标志，同一种东西，两次的保留时间相差不要超过15s，超过了半分钟可看做保留时间漂移，就无法进行定性，你要考虑以下原因：
①温控不当。
解决方法：
调好柱温，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
②流动相比例变化。
解决方法：
检查四元泵的比例阀是否有故障。
③色谱柱没有平衡。
解决方法：
在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
④流速变化。
解决方法：
重新设定流速。
⑤泵中有气泡。
解决方法：
从泵中除去气泡。
3峰型异常问题
峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。
①所有峰均为宽峰。
解决方法：
系统未达到平衡；
溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；
色谱柱尺寸及类型选择不正确；
色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；
温度变化造成的影响。
②所出峰比预想的小。
解决方法：
样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确，定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
③色谱图中未出峰。
解决方法：
系统未进样或样品分解；
泵未输液或流动相使用不正确；
检测器设置不正确；
针对以上情况成因作相应调整即可。
④一个峰或几个峰是负峰。
解决方法：
流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
⑤所有峰均为负峰。
解决方法：
信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；
光学装置尚未达到平衡。
⑥出现双峰或肩峰。
解决方法：
进样量过大；样品浓度过高；
保护柱或色谱柱柱头堵塞；
保护拄或色谱柱污染或失效；
柱塌陷或形成短通道。
⑦前伸峰。
解决方法：
进样量或样品浓度高；
溶解样品的溶剂较流动。
