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选择色谱分离柱主要根据那两点
点击次数:431 发布时间:2018-03-22
   色谱分离柱是保护分离柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱口的化学垃圾,这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头,较终降低柱效能。
  
  避免高压冲击分离柱。一般色谱分离柱都能承受得起高压,但经不住突然变化的高压冲击,这将改变柱床体积,影响柱效。
  
  定期冲洗分离柱。每次分析工作结束时,冲洗完缓冲盐后,较后要过度到用强溶剂冲洗柱子,如可用色谱纯甲醇、乙腈冲洗反相C18柱,目的是冲去吸附在柱上的强保留组分。如果用甲醇/水为流动相也应这样冲洗柱子,在一定程度上可恢复柱效。
  
  合理选择色谱分离柱。我们知道,选择色谱分离柱主要根据两点,一是根据待测组分的分子量的大小;二是根据流动相条件,包括PH值、离子强度和溶剂极性等。传统硅胶基质的键合相柱要求流动相PH值在3-7之间,极端PH值(>8)的流动相能溶解硅胶,使键合相流失。而目前利用的杂化颗粒技术研制的高纯硅胶颗粒填料(如Waters公司的XTerra色谱柱),集硅胶和多孔聚合物填料的优点为一体,使有机硅烷单元取代了相当一部分占据颗粒内部和表面位置的硅羟基,使这种新型填料具有分辨率高、稳定性强、PH范围宽(1-12)的优势,其性能突破了传统液相色谱柱的极限。所以一定要根据分析的对象、流动相的条件选择合适的分离柱,茫然时可向技术人员咨询。
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