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如何维护色谱分离柱的方法有哪些
点击次数:488 发布时间:2018-09-14
   色谱分离柱是较经典的有机物分离技术,原理和薄层色谱相同,但装置有所不同,主要由一个均匀玻璃柱和填充填料组成,填料是决定柱效的主要因素,填料必须满足具有不溶于所使用流动相、不使欲分离的样品破坏或分解、惰性大、可逆性强和吸附容量。
  
  如何维护色谱分离柱
  
  1.加保护柱(预柱)是保护色谱柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱口的化学垃圾,这些垃圾如果直接进入分离柱会逐渐堆积在柱头,降低柱效能。保护柱是消耗品,如分析血浆样品,一般分析50个样品后需更换新柱芯。
  
  2.避免高压冲击色谱分离柱。一般色谱柱都能承受得起高压,但经不住突然变化的高压冲击,这将改变柱床体积,影响柱效。引起高压冲击的原因主要有:进样器的样品阀的缓慢转动、泵启动太快、柱切换等操作。用手动进样阀时的压力变化不大,自动进样阀由于切换较慢,可能会造成压力冲击。
  
  3.合理选择液相色谱分析柱。我们知道,选择色谱分离柱主要根据两点,一是根据待测组分的分子量的大小;二是根据流动相条件,包括PH值、离子强度和溶剂极性等。
  
  4.定期冲洗色谱分离柱。每次分析工作结束时,冲洗完缓冲盐后,要过度到用强溶剂冲洗柱子,如可用色谱纯甲醇、乙腈冲洗反相C18柱,目的是冲去吸附在柱上的强保留组分。如果用甲醇/水为流动相也应这样冲洗柱子,在一定程度上可恢复柱效。
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